Después de estas cosas Dios pone a prueba a Abraham y le dice que tome a su hijo, su único, a quien ama, a Isaac, y lo ofrezca en holocausto en uno de los montes de la tierra de Moriah. Abraham se levanta de madrugada, apareja su asno, toma a dos criados y a Isaac, corta leña para el holocausto y se pone en camino. Al tercer día ve el lugar de lejos, deja a los criados con el asno y les dice que él y el muchacho irán a adorar y volverán.
Abraham pone la leña sobre Isaac, y él lleva el fuego y el cuchillo. Isaac pregunta dónde está el cordero para el holocausto, y Abraham responde que Dios mismo se proveerá de cordero. Llegan al lugar, Abraham edifica el altar, acomoda la leña, ata a Isaac y lo pone sobre el altar. Extiende la mano y toma el cuchillo para degollar a su hijo.
Entonces el ángel del Señor lo llama desde el cielo y le dice que no extienda su mano contra el muchacho, porque ahora sabe que teme a Dios, pues no le ha negado a su hijo, su único. Abraham alza los ojos y ve un carnero trabado por los cuernos en un zarzal, y lo ofrece en lugar de su hijo. Llama a aquel lugar El Señor proveerá. El ángel del Señor llama otra vez a Abraham desde el cielo y le jura por sí mismo que, porque ha obedecido, multiplicará su descendencia como las estrellas y la arena del mar, su descendencia poseerá la puerta de sus enemigos y en ella serán benditas todas las naciones de la tierra. Abraham vuelve con sus criados a Beerseba. El capítulo termina con la noticia de que a Nacor le han nacido hijos, entre ellos Betuel, padre de Rebeca.